近日,中科院青岛生物能源与过程研究所单细胞中心研发出一种新型单细胞分选技术——光镊辅助静态池成像分选技术(OPSI)。该技术可用于明场、荧光、拉曼成像下的目标单细胞分选,具有高通量、能保持细胞原位活性、“所见即所得”等特点。对高质量的单细胞基因组/转录组测序有着很大的支撑作用。相关研究成果发表于微流控领域国际期刊《芯片实验室》。
随着生命科学研究深入到单细胞水平,单细胞分选技术已经成为研究复杂细胞群体中单个细胞的个体性和异质性不可缺少的工具。精确、便捷、低损伤、使用范围广的目标表型单细胞获取手段对于单细胞水平的基因组、蛋白质组、代谢组等组学研究意义重大。目前常用的研究细胞表型信息的技术包括明场图像、荧光图像、拉曼光谱等,而能汇集上述信息并具备单细胞精度索引、所见即所得特点的单细胞分选技术在单细胞分析中应用广泛。
单细胞中心研发光镊辅助静态池成像分选技术以此前开发的拉曼分选-测序技术RAGE-Seq为基础。
RAGE-Seq通过联用光镊及微流控液滴技术,将特定拉曼表型的细菌单细胞从群体中精准分离,并包裹到皮升级液滴中,然后采用宏观移液的方式便可将包裹有目标细胞的液滴导出转移到试管中,从而快速、精确、简便地实现“单个细胞-单个液滴-单个试管”的拉曼分选流程。
OPSI在此基础上提出了一种静态池成像分选的思路,即在微流控芯片中构建流速为0的稳定静态流场,对样本细胞进行限域,并在该流场内进行平面明场、荧光成像或拉曼扫描,选取目标细胞。之后通过低细胞损伤的1064 nm光镊将目标单细胞移出静态流场,并进行单细胞液滴包裹导出完成分选。
OPSI以精确索引的方式进行分类,具有“所见即所得”的特点,并解决了RAGE-Seq操作过程稍显繁琐、分选通量较低等问题,广泛适用于从细菌、古菌到人体细胞等不同尺寸大小的单细胞。
据了解,单细胞中心已和当地企业合作,推出了自动化、智能化的单细胞微液滴分选系统系列产品,并与国际显微镜和显微光谱仪龙头产商合作,在全球科学仪器市场进行推广。OPSI及相关细胞分选产品的成功开发与推广不仅为单细胞多组学研究提供了有力的工具,也是我国生命科学仪器发展的重要成果。其在全球市场的推广将扩大我国生命科学仪器的国际影响力,推动国产仪器向海外市场开拓的进程。